實(shí)驗(yàn)部分

實(shí)驗(yàn)試劑和儀器

實(shí)驗(yàn)儀器: pH 計(jì)( 梅特樂(lè)320) ，分光光度計(jì)( UV2041PC) ，恒溫水浴鍋，離心機(jī)， 50 mL 比色管; 實(shí)驗(yàn)試劑: 次氯酸鈉，乙二胺四乙酸二鈉，硫代硫酸鈉，碘化鉀，可溶性淀粉，甲萘酚，碳酸鈉，無(wú)水乙醇，丙酮，氫氧化鈉( 以上試劑均為分析純) ，蒸餾水( 本文涉及的蒸餾水均為無(wú)氨水) ，氨氮標(biāo)準(zhǔn)0． 100 g /L( 國(guó)家標(biāo)物中心購(gòu)買(mǎi)) 。

 實(shí)驗(yàn)原理

氨在堿性溶液中與次氯酸鹽生成一氯胺，在EDTA-2Na 的催化下與酚生成吲哚藍(lán)藍(lán)料，比色定量。一氯胺和吲哚酚藍(lán)的形成均與溶液pH 值有關(guān)。次氯酸與氨在pH 為7． 5 以上主要生成二氯胺，當(dāng)pH 降低到5 ～ 7 和4． 5 以下時(shí)，分別生成二氯胺和三氯胺，pH 在10． 5 ～ 11． 5 之間時(shí)，生成的一氯胺和吲哚都較穩(wěn)定，且呈色較深［2］。

 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

根據(jù)PAC 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)( GB 1592-2003) 中的檢測(cè)方法，主要涉及到的試劑為次氯酸鈉、EDTA． NaOH 溶液、1—萘酚溶液。本文根據(jù)這三種試劑的加入量對(duì)吸光度的影響進(jìn)行了比較。根據(jù)原理，我們初步斷定所加的試劑中次氯酸鈉為反應(yīng)決定性物質(zhì)，EDTA． NaOH 為隱蔽劑，1 —萘酚溶液和前面生成的一氯胺生成染料。我們以三種試劑的加入量對(duì)氨氮標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度影響進(jìn)行分析。檢測(cè)方法根據(jù)GB 15892-2003 中的氨氮的檢測(cè)，為了檢測(cè)方便，用50 mL 比色管代替標(biāo)準(zhǔn)中的100 mL 容量瓶，所有試劑量將減半。并結(jié)合納氏試劑分光光度法進(jìn)行比對(duì)。

結(jié)果與討論

 次氯酸鈉的加入量對(duì)吸光度的影響

1) 不同次氯酸鈉濃度下的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

表1 的相關(guān)系數(shù)R2 = 0． 942 3，表2 的相關(guān)系數(shù)R2 = 0． 991 7。對(duì)比表1 和表2 的數(shù)據(jù)，可以明顯的看到相同濃度的氨氮的 ABS 存在很大的差別，這是由于在檢測(cè)中氨氮首先要和次氯酸鈉反應(yīng)生成一氯胺，然后才能和1—萘酚溶液反應(yīng)生成可以比色的吲哚藍(lán)藍(lán)料。

 表1 0． 15 mL 的次氯酸鈉+0． 50 mL 的
EDTA． NaOH 混合溶液+2． 50 mL 1—萘酚溶液

表2 0． 50 mL 的次氯酸鈉+0． 50 mL 的
EDTA． NaOH 混合溶液+2． 50 mL 1—萘酚溶液
 

根據(jù)化學(xué)動(dòng)力學(xué)原理，次氯酸鈉和氨氮反應(yīng)生成一氯胺是決定整個(gè)反應(yīng)速率的步驟。表2 的相關(guān)系數(shù)好于表1 的相關(guān)系數(shù)，在表1 中隨著氨氮濃度的增大ABS 有明顯的下降，這是由于次氯酸鈉濃度不足引起的。

2) 為了找出次氯酸鈉加入量和吸光度的關(guān)系，我們?cè)谙嗤钡獫舛认峦都硬煌康拇温人徕c( 其他兩個(gè)試劑的量不變) ，來(lái)測(cè)定ABS。

在一定的氨氮濃度下ABS 的值隨著次氯酸鈉加入量的提高而增大，達(dá)到較大值后下降。在較大值處不同的氨氮濃度需要不同的次氯酸鈉量，如表3 中的黑體部分。我們認(rèn)為當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度小于0． 60 mg /L 時(shí)，次氯酸鈉的加入量控制在0． 50 mL，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度達(dá)到1． 00 mg /L 時(shí)，次氯酸鈉的加入量控制在0． 70 mL。這樣才能保證單位濃度時(shí)有較大的ABS，曲線濃度上限控制在1． 00 mL 以下。

 pH 的影響

當(dāng)EDTA． NaOH 的量達(dá)到0． 50 mL( pH = 12． 05) 時(shí)，低濃度和高濃度的ABS 不隨pH 增加而上升，并且趨向穩(wěn)定。所以反應(yīng)中較好達(dá)到pH ＞ 12． 00，即EDTA． NaOH 量為0． 50 mL。

 1—萘酚的影響

高濃度和低濃度氨氮的ABS 都隨著1—萘酚的加入量先上升到達(dá)較高值，穩(wěn)定一段時(shí)間后，又開(kāi)始下降。所以1—萘酚的加入量控制在2． 5 mL ～ 3． 0 mL 之間即可。

 酚鹽分光光度法與納氏試劑分光光度法測(cè)定PAC 中的氨氮的比較

 PAC 的預(yù)處理

稱(chēng)取約10 g 液體試樣，精確至0． 001 g，移入500 mL 容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取25 mL 此溶液，置于 100 mL 容量瓶中，加1． 5 mL 硫酸溶液( 1 + 35) 搖勻后，加入5 mL 碳酸鈉溶液( 30 g /L) 并稀釋至刻度，輕輕搖勻。靜置使氫氧化物沉淀。用移液管移取25 mL 上清液于50 mL 比色管中，用于氫氧化鈉溶液調(diào)pH 至約11，備用。另取50 mL 上清液于50 mL 容量瓶中，備用。備用液在加入各種顯色劑時(shí)將產(chǎn)生沉淀，用離心機(jī)在3 000 r /min 條件下離心10 min，能很好的去除沉淀。

不同檢測(cè)方法對(duì)PAC 檢測(cè)結(jié)果比較

不同檢測(cè)方法對(duì)PAC 檢測(cè)結(jié)果的比較見(jiàn)表6。
 

從表6 中看出，當(dāng)酚鹽法低濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，質(zhì)控樣的相對(duì)誤差較小。但是兩種方法對(duì)PAC 測(cè)定的結(jié)果相差很大( 酚鹽法測(cè)定為0． 050 × 2 = 0． 100 mg /L，納氏試劑法測(cè)定結(jié)果為0． 332 mg /L) ，我們通過(guò)目色比較可以看出納氏試劑分光光度法中PAC 的顏色明顯低于0． 30 mg /L 的標(biāo)準(zhǔn)，但分光光度計(jì)測(cè)定結(jié)果卻高于 0． 30 mg /L，原因可能是PAC 中的其他金屬元素引起的偏差。

 結(jié)語(yǔ)

1) 酚鹽分光光度法測(cè)定氨氮時(shí)，我們認(rèn)為當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度小于0． 60 mg /L 時(shí)，次氯酸鈉的加入量控制在0． 50 mL，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)曲線的濃度達(dá)到1． 00 mg /L 時(shí)，次氯酸鈉的加入量控制在0． 70 mL。這樣才能保證單位濃度時(shí)有較大的ABS，曲線濃度上限控制在 1． 00 mg /L 以下。

2) 酚鹽分光光度法測(cè)定氨氮的較佳pH 為12． 0，此時(shí)單位濃度的ABS 較大，有利于檢測(cè)。

3) 甲萘酚的加入量也有一段較佳值，過(guò)少和過(guò)多的量都將造成單位濃度的ABS 下降，我們認(rèn)為50 mL 水樣的加入量應(yīng)控制在 2． 5 ～ 3． 0 之間。

4) 對(duì)于PAC 氨氮的濃度的測(cè)定，酚鹽分光光度法對(duì)PAC 中的其他元素的抗性干擾比納氏試劑分光光度法強(qiáng)，兩者在顯色穩(wěn)定性上都比較穩(wěn)定。